基因工程 | 分子生物学知识库

📖 定义

基因工程是利用重组 DNA 技术，将外源基因导入生物体，使其获得新性状或产生特定产物的技术。

🔑 关键概念

重组 DNA

将不同来源的 DNA 片段连接形成新的 DNA 分子

限制性内切酶

识别特定 DNA 序列并在特定位点切割的酶

DNA 连接酶

催化 DNA 片段之间磷酸二酯键形成的酶

质粒

细菌中独立于染色体的环状双链 DNA，常用作克隆载体

转化

将外源 DNA 导入细菌细胞的过程

转导

通过噬菌体将 DNA 导入细菌的过程

转染

将外源 DNA 导入真核细胞的过程

筛选标记

用于筛选成功转化细胞的基因，如抗生素抗性基因

📌 核心知识点

基因工程的基本步骤：目的基因获取、载体选择、酶切、连接、转化、筛选
限制性内切酶的识别序列和切割方式
常用载体的特点和选择
转化方法：热激法、电穿孔法
重组子的筛选和鉴定
基因表达系统：原核表达、真核表达

🔗 关联实体

分子生物学技术 PCR 基因组基因调控

📚 参考文献

Cohen SN, Chang AC. The plasmid as genetic element. PNAS, 1973
Cohen SN, et al. Construction of biologically functional bacterial plasmids in vitro. PNAS, 1973