分子生物学技术 | 分子生物学知识库

📖 定义

分子生物学技术是一系列用于研究 DNA、RNA 和蛋白质的方法学，包括 DNA 操作、基因克隆、基因表达分析、蛋白质分析等技术。

🔑 关键概念

PCR

聚合酶链式反应，体外扩增特定 DNA 片段的技术

RT-PCR

逆转录 PCR，以 RNA 为模板合成 cDNA 后进行 PCR 扩增

qPCR

实时定量 PCR，可定量检测 DNA 或 RNA 的拷贝数

基因克隆

将外源 DNA 片段插入载体并在宿主细胞中复制的过程

限制性内切酶

识别特定 DNA 序列并切割的酶

载体

携带外源 DNA 进入宿主细胞的 DNA 分子，如质粒、噬菌体

转化

将外源 DNA 导入细菌细胞的过程

转染

将外源 DNA 导入真核细胞的过程

📌 核心知识点

PCR 原理：变性-退火-延伸循环
基因克隆的基本步骤：酶切、连接、转化、筛选
常用载体类型：质粒、噬菌体、黏粒、BAC、YAC
DNA 测序技术原理
基因编辑技术：CRISPR-Cas9
基因表达分析技术：RT-qPCR、RNA-seq

🔗 关联实体

DNA 复制基因转录蛋白质翻译基因组

📚 参考文献

Saiki RK, et al. Enzymatic amplification of beta-globin genomic sequences. Science, 1985
Jinek M, et al. A programmable dual-RNA-guided DNA endonuclease in adaptive bacterial immunity. Science, 2012