第三章:信息传递
3.1 DNA复制概述
半保留复制
半保留复制
是DNA复制的核心机制:
亲代DNA: 5'-ATGC-3' 3'-TACG-5'
↓ 解旋
子代DNA1: 5'-ATGC-3' + 新合成: 3'-TACG-5'
子代DNA2: 新合成: 5'-ATGC-3' + 3'-TACG-5'
实验证明:Meselson和Stahl(1958)的¹⁵N同位素标记实验
复制起点与复制叉
| 概念 |
说明 |
| 复制起点(Origin) |
DNA复制开始的特定序列 |
| 复制叉(Replication fork) |
Y形结构,双链解开的区域 |
| 复制子(Replicon) |
从一个起点复制的DNA单位 |
原核生物:通常单一起点(如OriC)
真核生物:多个起点,形成复制泡
3.2 DNA复制机制
复制过程中的关键酶
| 酶 |
功能 |
特点 |
| 解旋酶(Helicase) |
解开双链 |
ATP供能,双向移动 |
| 单链结合蛋白(SSB) |
稳定单链 |
防止复性、降解 |
| 拓扑异构酶 |
缓解超螺旋 |
I型切断单链,II型切断双链 |
| DNA聚合酶 |
合成新链 |
5’→3’方向,需引物 |
| 引物酶(Primase) |
合成RNA引物 |
提供3’-OH末端 |
| DNA连接酶 |
连接片段 |
连接Okazaki片段 |
前导链与后随链
前导链与后随链
:
- 前导链(Leading strand):连续合成,方向与复制叉移动相同
- 后随链(Lagging strand):不连续合成,形成冈崎片段
半不连续复制:一条连续,一条不连续
DNA聚合酶特性
原核生物(以大肠杆菌为例):
| 聚合酶 |
功能 |
特点 |
| Pol I |
修复、切除RNA引物 |
5’→3’外切活性 |
| Pol II |
修复 |
SOS修复 |
| Pol III |
主要复制酶 |
高保真、高速度 |
真核生物:
-
Pol α
:合成RNA-DNA引物
-
Pol δ
:合成后随链
-
Pol ε
:合成前导链
3.3 转录
转录概述
转录
:以DNA为模板合成RNA的过程
DNA: 3'-TACG-5' → RNA: 5'-AUGC-3'
关键差异:
- 转录不需要引物
- 转录是局部的(基因选择性表达)
- RNA合成后释放,不保持双链
RNA聚合酶
| 类型 |
功能 |
产物 |
| RNA聚合酶I |
真核生物核仁 |
rRNA(除5S) |
| RNA聚合酶II |
真核生物核质 |
mRNA、snRNA、miRNA |
| RNA聚合酶III |
真核生物核质 |
tRNA、5S rRNA |
转录过程
1. 起始:
-
启动子
(Promoter):RNA聚合酶结合位点
-
TATA盒
:真核生物核心元件
- 转录起始复合物组装
2. 延伸:
- RNA聚合酶沿DNA移动
- 5’→3’合成RNA
- DNA-RNA杂合双链(约8-9bp)
3. 终止:
- 原核:ρ因子依赖/非依赖
- 真核:poly(A)信号、终止子
3.4 翻译
遗传密码
遗传密码
:mRNA上编码氨基酸的三联体密码子
| 特征 |
说明 |
| 密码子数 |
64个(4³) |
| 编码氨基酸 |
61个 |
| 终止密码子 |
3个:UAA、UAG、UGA |
| 起始密码子 |
AUG(编码Met) |
密码子特点:
- 简并性:多个密码子编码同一氨基酸
- 通用性:几乎所有生物共用
- 连续性:无标点,不重叠
- 方向性:5’→3’阅读
tRNA与氨基酸活化
tRNA
(转运RNA)的功能:
- 携带特定氨基酸
- 识别mRNA上的密码子(反密码子)
-
氨基酸臂
:结合氨基酸
-
反密码子环
:识别密码子
氨酰-tRNA合成酶
:催化氨基酸与tRNA连接,高度特异性
核糖体
核糖体
是蛋白质合成的场所:
| 亚基 |
原核 |
真核 |
| 大亚基 |
50S(23S+5S+蛋白质) |
60S(28S+5.8S+5S+蛋白质) |
| 小亚基 |
30S(16S+蛋白质) |
40S(18S+蛋白质) |
| 完整 |
70S |
80S |
功能位点:
- A位(氨酰位):接受新氨酰-tRNA
- P位(肽酰位):携带正在延伸的肽链
- E位(出口位):释放空载tRNA
翻译过程
1. 起始:
- 小亚基识别mRNA(SD序列或5'帽)
- 起始tRNA进入P位
- 大亚基结合
2. 延伸:
- 氨酰-tRNA进入A位
-
肽键形成
(肽酰转移酶催化)
- 核糖体移位
3. 终止:
3.5 逆转录与RNA复制
逆转录
逆转录
:RNA → DNA
-
逆转录酶
(Reverse transcriptase)
- 需要tRNA作为引物
- 产物:cDNA(互补DNA)
生物学意义:
-
逆转录病毒
(如HIV)
- 真核生物端粒酶
-
假基因
形成
本章小结
- DNA半保留复制确保遗传信息精确传递
- 复制是半不连续的,需要多种酶协同
- 转录以DNA为模板合成RNA,不需引物
- 翻译以mRNA为模板,tRNA转运氨基酸,核糖体催化
- 逆转录是中心法则的补充
思考题
- 为什么DNA复制需要RNA引物,而转录不需要?
- 真核生物为什么需要3种RNA聚合酶?
- 遗传密码的简并性有什么生物学意义?